懸浮細胞是指在培養(yǎng)時不貼附于支持介質(zhì)上,而呈懸浮狀態(tài)生長的細胞。懸浮細胞通常來源于血液、淋巴組織,例如某些腫瘤細胞和轉(zhuǎn)化細胞。懸浮細胞的特點是細胞呈圓形,一般不貼附于支持物上,易于大量繁殖。在體外培養(yǎng)的細胞類型中,懸浮細胞可以呈單個細胞或細小的細胞團生長。
常見的懸浮細胞,如淋巴細胞和大部分血液系統(tǒng)來源細胞。(如小鼠白血病細胞WEHI-3, 人白血病細胞K-562, HL-60)。工業(yè)上也有貼壁傳代細胞被馴化,進行全懸浮的培養(yǎng)。目前在工業(yè)中應用的主要有骨髓瘤SP2/0、NS0、CHO、BHK和HEK293細胞等,它們主要用于重組蛋白質(zhì)生產(chǎn);在獸用生物制品中常用的傳代細胞主要有采用全懸浮培養(yǎng)的BHK21細胞、MDCK細胞;及借助微載體懸浮培養(yǎng)的Vero細胞、PK細胞、ST細胞、 Marc145細胞等。
工業(yè)與生物制藥常用懸浮細胞?
?HEK293F細胞?:高效表達外源蛋白,常用于基因工程和蛋白質(zhì)生產(chǎn)。????
?CHO細胞?:生物制藥領(lǐng)域的代表,適應無血清懸浮培養(yǎng),適合大規(guī)模重組蛋白生產(chǎn)。????
?SF9細胞?:昆蟲細胞系,用于桿狀病毒表達系統(tǒng)。??
?Yeast細胞(如Pichia pastoris)?:可實現(xiàn)糖基化等后翻譯修飾,用于基因工程。??
?Hybridoma細胞?:用于單克隆抗體生產(chǎn)。??
獸用生物制品與實驗室研究細胞?
?BHK21與MDCK細胞?:獸用疫苗生產(chǎn)的常用懸浮細胞。??
?SP2/0與NS0細胞?:小鼠骨髓瘤細胞,用于抗體生產(chǎn)。??
?U937、HL60、K562?:人造血系腫瘤細胞,用于白血病等研究。??
?WEHI-3細胞?:小鼠白血病模型細胞。??
常見懸浮細胞類型?
?淋巴細胞?:天然懸浮生長,不依賴支持物表面。??
?小鼠腹水瘤S180?:實驗腫瘤模型細胞。??
懸浮細胞有哪些?又如何固定不掉片做免疫熒光呢?
懸浮細胞種類繁多,如何固定不掉片?固定后可以做免疫熒光,固定后可以單細胞層刺激,固定后保持活性繼續(xù)短時培養(yǎng)。這些實驗目的,可以使用懸浮細胞免疫熒光專用玻片Shi-Fix實現(xiàn)。懸浮細胞培養(yǎng)刺激好,吸取一點,PBS清洗,滴到玻片上,固定30分鐘,不要超過1小時。就可以實現(xiàn)懸浮細胞固定不掉片。
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